發(fā)布時(shí)間： 2019-03-26 點(diǎn)擊次數(shù)： 4293次
Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III采用大腸桿菌表達(dá)體系，是經(jīng)過高度純化的重組酶。該酶的RNA酶H活性很低，具有更高的熱穩(wěn)定性，廣泛應(yīng)用于鏈cDNA 的合成，反轉(zhuǎn)錄溫度高達(dá)55°C，特異性和cDNA產(chǎn)量明顯提高。
Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III都具有多種酶活性，主要包括以下幾種活性：
1、DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物末端以方向合成DNA。反轉(zhuǎn)錄酶中不具有外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA出錯(cuò)率比較高。
2、RNase H活性；由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子，將由RNase H從RNA5端水解掉RNA分子。
3、DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性；以反轉(zhuǎn)錄合成的條DNA單鏈為模板，以dNTP為底物，再合成第二條DNA分子。
除此之外，有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性，這可能與病毒基因整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中有關(guān)。
Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III注意事項(xiàng)：
對(duì)于GC含量比較高的RNA的反轉(zhuǎn)錄，試劑盒的使用說(shuō)明中給予了特別說(shuō)明，請(qǐng)予以關(guān)注。
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