SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應

簡要描述：貨　　號：P0500
名　　稱：SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應
規(guī)　　格：50T
價　　格：460.00

產品型號：

所屬分類：其他自產即用試劑

更新時間：2025-02-21

廠商性質：經(jīng)銷商

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詳情介紹

SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應

名稱	規(guī)格	保存條件
5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）	1ml	-20度
Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液	一包（10L）	RT
30%丙烯酰胺(29:1)	100mlX2	2-8度
1.5mol/LTris(pH8.8)	100mlX2	RT
1.0mol/LTris(pH6.8)	60ml	RT
過硫酸銨干粉	2g	RT
10%SDS	10ml	RT
TEMED	1.5ml	RT
說明書	一份	一份

產品簡介

本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備，蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。

本公司生產的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小，可進行約50次左右。

SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應

使用說明：

一，前期工作：蛋白提取及定量。

二，蛋白上樣液的制備：蛋白上樣緩沖液解凍，輕輕混勻，按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液，混勻，沸水中水浴5分鐘。

三，電泳液的配制：將一包電泳液干粉全部倒入1L－2L的燒柄中，加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋10倍。

四，取10-15支1.5ml離心管，將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支，標記好備用。

五，凝膠制備：

1，取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉，加入1ml蒸餾水，混勻，此配好的10%過硫酸銨溶液2－8度可保存一周，一周后請用新的。洗干凈電泳玻璃板，夾好。

2，根據(jù)目標蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。

	分離膠15%	分離膠12%	分離膠10%	分離膠8%	濃縮膠（5%）
總體積	10ml	10ml	10ml	10ml	5ml
30%丙烯酰胺(29:1)	5ml	4ml	3.3ml	2.7ml	0.83ml
1M Tris-HCL (PH6.8)	0	0	0	0	0.625ml
1.5M Tris-HCL(PH8.8)	2.5ml	2.5ml	2.5ml	2.5ml	0
10%SDS	100ul	100ul	100ul	100ul	50ul
ddH2O	2.3ml	3.3ml	4.0ml	4.6ml	3.42ml
10%過硫酸銨	100ul	100ul	100ul	100ul	75ul
TEMED	10ul	10ul	10ul	10ul	7.5ul

注意：

1，TEMED和10%過硫酸銨zui后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4℃有效期為一周，TEMED易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內可以凝固，如溫度過低，可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加1ml ddH2O封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。

2，配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調整，主要是調整30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%），zui后用水補足總體積。

六，上樣，電泳，一般是濃縮膠80V，分離膠120V恒壓，等溴酚蘭電泳到合適的位置，結束電泳，染色或者進行下一步實驗。

附：SDS-PAGE分離膠的濃度與*分離范圍

SDS-PAGE分離膠濃度	*分離范圍
6%膠	57-212kD
8%膠	36-94kD
10%膠	20-80kD
12%膠	12-60kD
15%膠	10-43kD

配制6%的PAGE分離膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	5	10	15	20	25	30
蒸餾水	2.6	5.3	7.9	10.6	13.2	15.9
30%丙烯酰胺混合液	1.0	2.0	3.0	4.0	5	6.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%過硫酸銨	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.004	0.008	0.012	0.016	0.02	0.024

配制8%的PAGE分離膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	5	10	15	20	25	30
蒸餾水	2.3	4.6	6.9	9.3	11.5	13.9
30%丙烯酰胺混合液	1.3	2.7	4.0	5.3	6.7	8.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%過硫酸銨	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.003	0.006	0.009	0.012	0.015	0.018

配制10%的PAGE分離膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	5	10	15	20	25	30
蒸餾水	1.9	4.0	5.9	7.9	9.9	11.9
30%丙烯酰胺混合液	1.7	3.3	5.0	6.7	8.3	10.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%過硫酸銨	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.01	0.012

配制12%的PAGE分離膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	5	10	15	20	25	30
蒸餾水	1.6	3.3	4.9	6.6	8.2	9.9
30%丙烯酰胺混合液	2.0	4.0	6.0	8.0	10.0	12.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.015	0.2	0.25	0.3
10%過硫酸銨	0.05	0.1	0.015	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.01	0.012

配制15%的PAGE分離膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	5	10	15	20	25	30
蒸餾水	1.1	2.3	3.4	4.6	5.7	6.9
30%丙烯酰胺混合液	2.5	5.0	7.5	10.0	12.5	15.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)	1.3	2.5	3.8	5.0	6.3	7.5
10%SDS	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
10%過硫酸銨	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25	0.3
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.001	0.012

3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱上層膠、積層膠或堆積膠)

配制不同體積的濃縮膠

成分	所需各成分的體積(毫升)
凝膠體積	2	3	4	5	6	8
蒸餾水	1.4	2.1	2.7	3.4	4.1	5.5
30%丙烯酰胺混合液	0.33	0.5	0.67	0.83	1.0	1.3
1.0mol/L Tris(pH6.8)	0.25	0.38	0.5	0.63	0.75	1.0
10%SDS	0.02	0.03	0.04	0.05	0.06	0.08
10%過硫酸銨	0.02	0.03	0.04	0.05	0.06	0.08
TEMED	0.002	0.003	0.004	0.005	0.006	0.008