BCA蛋白濃度測定試劑盒 BL521A 現貨

BCA 蛋白濃度測定試劑盒 產品編號 產品名稱 規格 BL521A BCA 蛋白濃度測定試劑盒 500 次 簡介： BCA 蛋白濃度測定試劑盒的原理是蛋白質分子中肽鍵結構在堿性環境下能與 Cu2+生產 絡合物，并將 Cu2+還原成 Cu+，而 BCA 試劑可以特異性地與 Cu+結合，形成穩定的有顏色的 復合物，并在 562nm 處有zui大的光吸收值，該復合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，可以 根據吸收值的大小來測定蛋白的含量。 試劑盒組份： 產品編號 產品名稱 規格 BL521A-1 BCA 試劑 A 100 ml BL521A-2 BCA 試劑 B 3 ml BL521A-3 牛血清白蛋白(BSA)標準溶液（5 mg/ml） 2×1 ml BL521A-4 PBS 溶液 10 ml 使用說明： BCA 工作液配制： BCA 工作液配制： 將試劑 A 和試劑 B 按照體積比 50:1 比例混合，配成 BCA 工作液。 如，取 50ml 試劑 A 與 1ml 試劑 B 混合，配成 51 ml BCA 工作液。兩者混合時會有 沉淀形成，*混勻后沉淀消失，溶液應為澄清淡藍色溶液。。 注：BCA 工作液室溫可放置一周不失效。 微孔板測定程序：（工作范圍 20-2000 μg/ml） 1、蛋白標準品配制：室溫*溶解蛋白標準品，取 20µl 5mg/ml BSA 蛋白標準溶液用 PBS 溶液稀釋至 100µl，使其終濃度為 1.0 mg/ml。 2、按照下表配制 BSA 標準測定溶液： 編號 0 1 2 3 4 5 6 7 8 1 mg/ml BSA 標準溶液 μl 5 mg/ml BSA 標準溶液 μl BSA 標準溶液 µl 0 0.5 2.5 5.0 10 15 20 6 8 PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12 BSA 終濃度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000 總體積 µl 20 µl 3、將適當體積的待測樣品加入到微孔板中，并用 PBS 補足到 20 µl

4、向微孔板中加入 200 μl BCA 工作液，混勻，37℃放置 30 分鐘； 注：也可以室溫放置 2 小時，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時，顏色會隨 著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫 度孵育，或適當延長孵育時間。 5、測定 562 nm 處的吸光值，并記錄讀數；以不含 BSA 的樣品的光吸收值作為空白對 照。 6、以 A562 為縱坐標，BSA 含量為橫坐標，繪制標準曲線，計算樣品中的蛋白濃度。如 果所得到的蛋白濃度不在標準曲線范圍內，請稀釋樣品后重新測定。 試管測定程序：（工作范圍 20-1000 μg/ml） 1、蛋白標準品配制：室溫*溶解蛋白標準品，取 150µl 5mg/ml BSA 蛋白標準溶液， 加入 600μl PBS 溶液稀釋至 750µl，使其終濃度為 1.0 mg/ml。 2、按照下表配制 BSA 標準測定溶液： 3、將適當體積的待測樣品加入到試管中，并用 PBS 補足到 100 µl； 4、向試管中加入 2ml BCA 工作液，混勻，37℃放置 30 分鐘； 5、6 步驟同上。 產品特點： 1、靈敏度高，檢測濃度下限達到 25µg/ml（在 20-1000μg/ml 濃度范圍內有較好的線 性關系），zui小檢測蛋白量達到 0.2μg，待測樣品體積為 1-20μl。 2、BCA 法測定蛋白濃度的zui大優點是蛋白濃度的測定可以耐受高濃度的去垢劑，可以 兼容樣品中高達 5%的 SDS，5%的 Triton X-100，5%的 Tween 20, 60, 80。但受螯合劑和略 高濃度的還原劑的影響，需確保 EDTA 低于 10mM，無 EGTA，二硫蘇糖醇低于 1mM，β-巰基 乙醇低于 0.01%。 3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 保存條件： 試劑 A 和試劑 B 室溫貯存；牛血清白蛋白標準溶液-20℃貯存；PBS 溶液 4℃貯存。本試 劑盒有效期 1 年。

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